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生長激素(GH)ELISA試劑盒的原理及操作步驟

更新時間:2022-10-28 瀏覽次數:841

  生長激素(GH)ELISA試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中人生長激素(GH)的含量。
 
  生長激素(GH)ELISA試劑盒的實驗原理:
 
  采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗人GH單抗包被于酶標板上,標準品和樣品中的GH與單抗結合,加入生物素化的抗人GH,形成免疫復合物連接在板上,辣根過氧化物酶標記的Streptavidin與生物素結合,加入底物工作液顯藍色,最后加終止液硫酸,在450nm處測OD值,GH濃度與OD值成正比,可通過繪制標準曲線求出標本中GH濃度。
 
  生長激素(GH)ELISA試劑盒的操作步驟:
 
  1、從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
 
  2、設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
 
  3、樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
 
  4、除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
 
  5、棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
 
  6、每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
 
  7、每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

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