檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被卵黃蛋白原（VTG）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的卵黃蛋白原（VTG）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

科研魚卵黃蛋白原(VTG)ELISA檢測試劑盒組成及試劑配制：（檢測范圍請參考說明書）

1. 酶標板（Microelisa stripplate）：一塊（96孔或者48孔）

2. 標準品（Standard）：0.3ml*6管或者0.3ml*6管

3. 稀釋液（Sample Diluent）：6ml或者3ml

4. 檢測抗體-HRP（HRP-Conjugate reagent）：10ml或者5ml

5. 20x洗滌緩沖液（20X Wash solution）：25ml或者15ml（按說明書進行稀釋）

6. 底物A（Chromogen Solution A）：6ml或者3ml

7. 底物B（Chromogen Solution B）：6ml或者3ml

8. 終止液（Stop Solution）：6ml或者3ml

9. 封板膜（Closure plate membrane）：2張

10. 說明書（User manual）：1份

11. 自封袋（Sealed bags）：1個

實驗應注意的試驗規矩：

1.酶標板從冷藏環境中取出時應康復至室溫方可開袋，未用完的酶標板需放入有干燥劑的密封袋中保存。
2.試驗操作時需戴手套、穿工作衣，嚴厲健全和履行消du隔絕原則，各種試驗廢棄物都應按感染物處理。
3.停止液具有腐蝕性，應避免觸摸皮膚和衣物，如不小心觸摸請立即用很多自來水沖刷。
4.濃縮洗刷液在低溫時簡單結晶，使用時需康復至室溫以*溶解。
5.洗刷時各孔均需加滿液體，避免孔口有游離酶不能洗凈。

科研魚卵黃蛋白原(VTG)ELISA檢測試劑盒樣本要求：液體類標本（血清血漿、尿液、組織勻漿液、細胞培養上清、尿液、胸腹水、腦脊液等標本）

【血清標本】收集、處理及保存方法：使用不含熱原和內毒素的試管，操作過程中避免任何細胞 刺激，收集血液后，3000 轉離心 10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地 分離。

【血漿標本】收集、處理及保存方法：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心 30 分鐘取上清。

【細胞培養上清液】收集、處理及保存方法：3000 轉離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。

【組織勻漿】收集、處理及保存方法：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心 10 分鐘 取上清。

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